為什么要細胞計數(shù)？

　　在細胞培養(yǎng)工作中，常需要了解細胞生活狀態(tài)和鑒別細胞死活，確定細胞接種濃度和數(shù)量以及了解細胞存活率和增殖度，如用酶消化制備的細胞懸液中細胞活力的鑒別，凍存細胞復(fù)蘇后的活力檢測等。細胞懸液制備后，常用活體染料臺盼藍對細胞進行染色，進行細胞計數(shù)。準確的細胞計數(shù)對評估培養(yǎng)的細胞生長是至關(guān)重要，因為錯誤的計數(shù)會導(dǎo)致關(guān)于細胞健康的錯誤結(jié)論。細胞計數(shù)可以使用血球計數(shù)板、自動計數(shù)器進行。細胞計數(shù)一般用血細胞計數(shù)板，按白細胞計數(shù)方法進行計數(shù)，便于確定細胞的生活狀況。
 
　　細胞生長的每個階段：
 
　　停滯期：細胞適應(yīng)培養(yǎng)條件的階段，細胞在此階段不分裂。細胞通常在起始培養(yǎng)后的24小時內(nèi)附著，該階段的總時長取決于培養(yǎng)之初使用細胞的生長階段和接種密度。
 
　　對數(shù)期：細胞在此階段積極分裂，是評估群體生長和通用數(shù)據(jù)收集的時間。對數(shù)期的后期，過度擁擠導(dǎo)致細胞脅迫之前是傳代細胞(亞培養(yǎng))的時機。
 
　　平穩(wěn)期：隨著細胞達到100%融合，細胞在此階段生長放緩，不足1/10的細胞處于活躍細胞周期。細胞在此階段容易受傷，因此需要小心觀察以確保細胞在此階段之前或之初進行傳代。
 
　　衰退期：細胞周期的自然組成部分。在此階段，隨著細胞死亡占據(jù)主導(dǎo)地位，活細胞群體數(shù)量減少。
 
　　細胞計數(shù)原理：細胞懸液制備后，需要計算懸液中所含細胞數(shù)量；一般以細胞數(shù)/毫升表示。因只有健康的細胞才有活力，接種后能夠生長增殖，所以在接種應(yīng)先檢查一下細胞的活力。